Breeding and reproductive behaviour of the neo-tropical opossum, Didelphis marsupialis insularis, Allen 1902 under captive conditions / Reprodução e comportamento reprodutivo do gambá neotropical, Didelphis marsupialis insularis, Allen 1902, em condições de cativeiro

Developing a captive breeding system for the widely hunted Caribbean species of opossum Didelphis marsupialis insularis can greatly aide in the management and conservation of this species in the neo-tropics. Although this species possesses ideal traits for captive breeding in this region (tolerance to high heat and humidity, high reproductive rate, and resistance to disease), challenges due to its aggressive behaviour and limited information on its breeding behaviour have prevented a system from being developed for this species. The present study describes a breeding system, and the reproductive behaviour of this species under captive conditions. Six (1 male; 5 females) adult opossums were maintained and managed for breeding over a ten (10) month period. Pouch litter sizes averaged 5±2.5 with a range of 2 to 8. Gestation length was found to be 13.25±0.96 days and 4 litters (n=23) were successfully weaned at 11-13 weeks. It was found that the male D. m. insularis exhibits behaviours of interest that can serve as indicators for receptivity of the female, and overall, that this species can be successfully reared and bred under captive conditions in the neo-tropics.

O desenvolvimento de um sistema de criação em cativeiro para as espécies de gambá do Caribe amplamente caçadas, Didelphis marsupialis insularis, pode auxiliar bastante no manejo e conservação dessa espécie nos neotrópicos. Embora essa espécie possua características ideais para a criação em cativeiro nessa região (tolerância a altas temperaturas e umidade, alta taxa de reprodução e resistência a doenças), alguns fatores, como o seu comportamento agressivo e informações limitadas sobre seu comportamento reprodutivo, impediram o desenvolvimento de um sistema para D. m. insularis. O presente estudo descreve um sistema de criação e o comportamento reprodutivo dessa espécie em condições de cativeiro. Seis gambás adultos (1 macho e 5 fêmeas) foram mantidos para reprodução durante um período de 10 meses. O tamanho da ninhada em bolsa foi em média de 5 ± 2,5 com um intervalo de 2 a 8. A duração da gestação foi de 13,25 ± 0,96 dias, e 4 ninhadas (n = 23) foram desmamadas com sucesso de 11 a 13 semanas. Verificou-se que o macho D. m. insularis exibe comportamentos de interesse que podem servir como indicadores de receptividade da fêmea, e, em geral, essa espécie pode ser criada com sucesso em condições de cativeiro nos neotrópicos.

Breeding and reproductive behaviour of the neo-tropical opossum, Didelphis marsupialis insularis, Allen 1902 under captive conditions / Reprodução e comportamento reprodutivo do gambá neotropical, Didelphis marsupialis insularis, Allen 1902, em condições de cativeiro

Developing a captive breeding system for the widely hunted Caribbean species of opossum Didelphis marsupialis insularis can greatly aide in the management and conservation of this species in the neo-tropics. Although this species possesses ideal traits for captive breeding in this region (tolerance to high heat and humidity, high reproductive rate, and resistance to disease), challenges due to its aggressive behaviour and limited information on its breeding behaviour have prevented a system from being developed for this species. The present study describes a breeding system, and the reproductive behaviour of this species under captive conditions. Six (1 male; 5 females) adult opossums were maintained and managed for breeding over a ten (10) month period. Pouch litter sizes averaged 5±2.5 with a range of 2 to 8. Gestation length was found to be 13.25±0.96 days and 4 litters (n=23) were successfully weaned at 11-13 weeks. It was found that the male D. m. insularis exhibits behaviours of interest that can serve as indicators for receptivity of the female, and overall, that this species can be successfully reared and bred under captive conditions in the neo-tropics.

O desenvolvimento de um sistema de criação em cativeiro para as espécies de gambá do Caribe amplamente caçadas, Didelphis marsupialis insularis, pode auxiliar bastante no manejo e conservação dessa espécie nos neotrópicos. Embora essa espécie possua características ideais para a criação em cativeiro nessa região (tolerância a altas temperaturas e umidade, alta taxa de reprodução e resistência a doenças), alguns fatores, como o seu comportamento agressivo e informações limitadas sobre seu comportamento reprodutivo, impediram o desenvolvimento de um sistema para D. m. insularis. O presente estudo descreve um sistema de criação e o comportamento reprodutivo dessa espécie em condições de cativeiro. Seis gambás adultos (1 macho e 5 fêmeas) foram mantidos para reprodução durante um período de 10 meses. O tamanho da ninhada em bolsa foi em média de 5 ± 2,5 com um intervalo de 2 a 8. A duração da gestação foi de 13,25 ± 0,96 dias, e 4 ninhadas (n = 23) foram desmamadas com sucesso de 11 a 13 semanas. Verificou-se que o macho D. m. insularis exibe comportamentos de interesse que podem servir como indicadores de receptividade da fêmea, e, em geral, essa espécie pode ser criada com sucesso em condições de cativeiro nos neotrópicos.

Anatomical characteristics of the bones of the thoracic limb of white-eared opossum (Didelphis albiventris) / Características anatómicas de los huesos del miembro torácico de la zarigüeya oreja blanca (Didelphis albiventris)

SUMMARY: The skeleton of the thoracic limb is one of the key aspects for the understanding of the habits and movement of different mammalian species. Considering the gap about studies related to marsupial osteology, this work proposes to study the aspects inherent to the skeleton of opossums, with emphasis on the detailed anatomical description of the bones that form the thoracic limb. For this purpose, the bones of six specimens of possums of the species Didelphis albiventris were used. These small to medium sized marsupials inhabit a wide range of South America, living in several types of habitats, being commonly described as arboreal omnivores and have anthropic habits. For the execution of this study, the bone accidents perceptible in the specimens were identified by superficial palpation, which were then radiographed. The thoracic limb bones were prepared by boiling and drying in the sun. Finally, from the radiographic images and the prepared bones, a detailed description of the anatomy of the bone components of the thoracic limb of Didelphis albiventris was made, joining the previously obtained data of surface anatomy. These data were compared with data from the literature, discussing the functional significance of the osteological findings of the thoracic limb of Didelphis albiventris.

RESUMEN: El esqueleto del miembro torácico es uno de los aspectos clave para el conocimiento de los hábitos y movimientos de las diferentes especies de mamíferos. Considerando los escasos estudios relacionados con la osteología marsupial, este trabajo se propusoestudiar los aspectos inherentes al esqueleto de la zarigüeya, con énfasis en la descripción anatómica detallada de los huesos que forman el miembro torácico. Para ello se utilizaron los huesos de seis ejemplares de zarigüeyas de la especie Didelphis albiventris. Estos marsupiales de pequeño a mediano tamaño habitan una zona amplia de América del Sur, viven en varios tipos de hábitats, se describen comúnmente como omnívoros arbóreos y tienen hábitos antrópicos. Para este estudio se identificaron mediante palpación superficial los accidentes óseos perceptibles en los especímenes, y posteriormente se tomaron imágens radiológicas. Los huesos de los miembros torácicos se prepararon hirviéndolos y secándolos al sol. Finalmente, a partir de las imágenes radiográficas y de los huesos preparados, se realizó una descripción detallada de la anatomía de los componentes óseos del miembro torácico de Didelphis albiventris, uniendo los datos de anatomía superficial obtenidos previamente. Estos datos se compararon con datos de la literatura, discutiendo la importancia funcional de los hallazgos osteológicos del miembro torácico de Didelphis albiventris.

'Candidatus Mycoplasma haemoalbiventris' and tick-borne pathogens screening in white-eared opossums (Didelphis albiventris) from Curitiba and Foz do Iguaçu Cities, Paraná State, southern Brazil / 'Candidatus Mycoplasma haemoalbiventris' e triagem para patógenos transmitidos por carrapatos em gambás de orelha branca (Didelphis albiventris) das cidades de Curitiba e Foz do Iguaçu, Estado do Paraná, sul do Brasil

Abstract Hemoplasmas are epierythrocytic bacteria that infect mammals. 'Candidatus Mycoplasma haemoalbiventris' was detected in white-eared opossums (Didelphis albiventris) from southern and central-western Brazil. The present study aimed at: i) screening opossums for tick-borne (TBP) pathogens (Piroplasmida and Anaplasmataceae) and ii) detecting and characterizing hemoplasma species infecting opossums from Curitiba and Foz do Iguaçu cities in the Paraná State, southern Brazil. Thirty blood samples from white-eared opossums were evaluated by PCR assays. Animals were not infested by ectoparasites. The mammalian endogenous gapdh gene was consistently amplified in all samples. All opossums tested negative for Theileria/Babesia spp. and Ehrlichia/Anaplasma spp. by PCR based on 18S rRNA and 16S rRNA genes, respectively. A genus-specific PCR assay based on the 16S rRNA gene of hemoplasmas showed that three/13 (23.08%; CI 95%: 8.18-50.26%) opossums from Foz do Iguaçu were positive for hemotropic Mycoplasma sp. All opossums from Curitiba tested negative for hemoplasmas. Sequencing of both the 16S and 23S rRNA genes revealed that the animals were infected by 'Ca. M. haemoalbiventris'. Although 'Ca. M. haemoalbiventris' is prevalent in opossums in Brazil, clinical signs associated with its infection and its putative vectors remain unknown.

Resumo Hemoplasmas são bactérias epieritrocíticas que infectam mamíferos. 'Candidatus Mycoplasma haemoalbiventris' foi detectado previamente em gambás-de-orelha-branca (Didelphis albiventris) das regiões sul e centro-oeste do Brasil. O presente estudo objetivou: i) triar os gambás para as doenças transmitidas por carrapatos (Piroplasmida e Anaplasmataceae); e ii) detectar e caracterizar as espécies de hemoplasma que infectam gambás nas cidades de Curitiba e Foz do Iguaçu, no Estado do Paraná, sul do Brasil. Trinta amostras de sangue de gambás-de-orelha-branca foram analisadas por PCR. Os animais não estavam infestados por ectoparasitos. O gene endógeno de mamífero gapdh foi amplificado em todas as amostras. Todos os gambás testaram negativos para Theileria/Babesia spp. e Ehrlichia/Anaplasma spp. por PCR, respectivamente, para os genes 18S rRNA e 16S rRNA. Uma PCR gene-específica, baseada no gene 16S rRNA de hemoplasmas, mostrou que três/13 (23,08%; CI 95%: 8,18-50,26%) gambás de Foz do Iguaçu foram positivos para Mycoplasma sp. hemotrópico. Todos os gambás de Curitiba testaram negativos para hemoplasmas. O sequenciamento de fragmentos dos genes 16S e 23S rRNA revelou que os animais estavam infectados pelo 'Ca. M. haemoalbiventris'. Embora 'Ca. M. haemoalbiventris' seja prevalente em gambás no Brasil, os sinais clínicos associados à infecção e os prováveis vetores permanecem desconhecidos.

Sarcocystis neurona, seroprevalence of antibodies in equines and research of oocystis in opossum in Ilhéus - Itabuna microregion, Bahia, Brazil / Sarcocystis neurona, seroprevalência de anticorpos em equinos e pesquisa de oocistos em gambás na microrregião de Ilhéus - Itabuna, Bahia, Brasil

Abstract The aims of this study were to determine the seroprevalence of Sarcocystis neurona antibodies in equines in the Ilhéus-Itabuna microregion (BA), and identify possible factors associated with infection. The presence of sporocysts/oocysts of Sarcocystis spp. was also verified in Didelphis spp. A total of 669 serum samples were collected from equines in 56 properties located in 12 municipalities in the region. Indirect fluorescent antibody test was performed with slides containing merozoites of the S. neurona, using a cut-off titer of 1:80. Occurrence of 7.92% of anti-S. neurona antibodies was observed in the sampled equines. The purposes trade and work were significantly associated with the presence of antibodies (p<0.05), and being used for the purpose of work (21.6%) was considered a risk factor, while being used for the purpose of trade (3.6%) was a protective factor. A total of 25 Didelphis spp. was captured for research on sporocysts/oocysts in stool samples and intestinal scrapings, being all negative. Didelphis spp. were all negative for the presence of Sarcocystis spp. and this circumstance does not change the fact that seroprevalence of S. neurona has been observed in horses raised in the southern Bahia.

Resumo O presente estudo foi realizado na microrregião de Ilhéus-Itabuna, Bahia. Os objetivos deste estudo foram determinar a soroprevalência de anticorpos contra Sarcocystis neurona em equinos da microrregião Ilhéus-Itabuna (BA) e identificar possíveis fatores associados à infecção. A presença de esporocistos/oocistos de Sarcocystis spp. também foi pesquisada em Didelphis spp. Foram coletadas 669 amostras de soro de equinos em 56 propriedades localizadas em 12 municípios da região. Foi utilizada a reação de imunofluorescência indireta (RIFI), utilizando-se lâminas confeccionadas com merozoítos de Sarcocystis neurona (cepa SN138) e ponto de corte na diluição de 1:80. A ocorrência de anticorpos anti- S. neurona, nos equinos amostrados, foi de 7,92%. As finalidades dos animais - comércio e trabalho - apresentaram-se significativas (p<0.05), sendo que a finalidade trabalho (21,6%) foi considerada fator de risco, enquanto a finalidade comércio (3,6%) foi considerada fator de proteção. Foram capturados 25 Didelphis spp., para pesquisa de esporocistos/oocistos em amostras de fezes e raspado de mucosa intestinal. Todos os Didelphis spp. foram negativos para a presença de Sarcocystis spp., mesmo assim essa circunstância não alterou o fato da ocorrência de S. neurona ter sido observada em cavalos criados na mesorregião do sul da Bahia.

Sarcocystis neurona and related Sarcocystis spp. shed by opossums (Didelphis spp.) in South America / Sarcocystis neurona e Sarcocystis spp. relacionados, excretados por gambás (Didelphis spp.) na América do Sul

Abstract Protozoan parasites of the genus Sarcocystis are obligatory heteroxenous cyst-forming coccidia that infect a wide variety of animals and encompass approximately 200 described species. At least four Sarcocystis spp. (S. falcatula, S. neurona, S. lindsayi and S. speeri) use opossums (Didelphis spp.) as definitive hosts, and two of them, S. neurona and S. falcatula, are known to cause disease in horses and birds, respectively. Opossums are restricted to the Americas, but their distribution in the Americas is heterogeneous. Five Didelphis spp. are distributed in South America (D. aurita, D. albiventris, D. marsupialis, D. imperfecta and D. pernigra) whereas just one opossum species (D. virginiana) is found in North America. Studies conducted in the last decades show that Sarcocystis spp., derived from South American Didelphis spp., have biological and genetic differences in relation to Sarcocystis spp. shed by the North American opossum D. virginiana. The aim of this review was to address the peculiar scenario of Sarcocystis species shed by South American opossums, with a special focus on diagnosis, epidemiology, and animal infections, as well as the genetic characteristics of these parasites.

Resumo Parasitos protozoários do gênero Sarcocystis são coccídios heteroxenos formadores de cistos, que infectam variadas espécies animais e compreendem cerca de 200 espécies descritas. Pelo menos quatro Sarcocystis spp. (S. falcatula, S. neurona, S. lindsayi e S. speeri) utilizam gambás (Didelphis spp.) como hospedeiros definitivos; e duas delas, S. neurona and S. falcatula são conhecidas por causarem doença em equinos e aves, respectivamente. Gambás didelfídeos são restritos ao continente americano, contudo são distribuídos de forma heterogênea nas Américas. Cinco Didelphis spp. são distribuídos na América do Sul (D. aurita, D. albiventris, D. marsupialis, D. imperfecta e D. pernigra), enquanto somente uma espécie (D. virginiana) é encontrada na América do Norte. Trabalhos conduzidos, nas últimas décadas, mostram que Sarcocystis spp. derivados de Didelphis spp. sul-americanos possuem diferenças biológicas e genéticas, quando comparados a Sarcocystis spp. excretados pelo gambá norte-americano D. virginiana. O objetivo desta revisão é discutir a situação peculiar das espécies de Sarcocystis na América do Sul com um foco especial em diagnóstico, epidemiologia e infecções animais, assim como nas características genéticas desses parasitos.

Colonization of Panstrongylus megistus (Hemiptera: Reduvidae:Triatominae) in an urban area and its association with Didelphis marsupialis in the metropolitan region of São Paulo

Abstract INTRODUCTION: This communication reports the colonization of Panstrongylus megistus in an urban area of the municipality of Taboão da Serra in the metropolitan region of São Paulo. METHODS: After receiving a notification from the population, entomological research comprising active search, collection, identification, and examination of triatomines was conducted. Wild animals were captured and examined. RESULTS: A colony of triatomines was found to be associated with dogs in the backyard of the property. CONCLUSIONS: The colonization of P. megistus shows the potential for their occupation of artificial ecotopes, which may pose a risk to the human population.

Rickets in white-eared opossums (Didelphis albiventris) / Raquitismo em gambás-de-orelha-branca (Didelphis albiventris)

Two young opossums were necropsied and diagnosed with rickets. This study aims to describe the clinical-pathological aspects of rickets in Didelphis albiventris. Macroscopically, the opossums presented kyphosis and scoliosis, lateral deviation of the limbs in varus, locomotion difficulty, and enlargement with softening of costochondral junctions (rickety rosary). Samples of bones and joints were processed for hematoxylin and eosin staining and Masson's trichrome. Microscopically, we observed thickening of the epiphyseal plate, characterized by irregular and multifocal proliferation of serialized and hypertrophic cartilage zones, which formed circular groups of large, dysplastic chondrocytes towards the spongy zone, often surrounded by non-mineralized osteoid tissue. In the cortical bone, there were pale eosinophilic zones around the Havers channels consistent with non-mineralized osteoid. The staining of Masson's trichrome evidenced the accumulation of osteoid tissue in cortical and trabecular bones. It is possible that a mixed cause of absorption deficiency of vitamin D3 associated with an unbalanced Ca:P diet based on lactose-free milk and fruits may have triggered the disease.(AU)

Dois gambás jovens foram necropsiados e diagnosticados com raquitismo. O objetivo do trabalho é descrever os aspectos clínico-patológicos de raquitismo em Didelphis albiventris. Macroscopicamente os gambás apresentaram cifose e escoliose, desvio lateral dos membros em varus, dificuldade de locomoção e alargamento com amolecimento das junções costocondrais (rosário raquítico). Amostras dos ossos e articulações foram processadas para coloração de hematoxilina e eosina e Tricrômico de Masson. Microscopicamente havia espessamento da placa epifisária, caracterizada pela proliferação irregular e multifocal das zonas de cartilagem seriada e hipertrófica, que formavam grupos circulares de condrócitos grandes, displásicos em direção a zona esponjosa frequentemente cercados por tecido osteoide não mineralizado. No osso cortical haviam zonas eosinofílicas pálidas ao redor dos canais de Havers consistentes com osteoide não mineralizado. A coloração de Tricrômico de Masson evidenciou o acúmulo de tecido osteoide no nosso cortical e trabecular. Acredita-se que uma causa mista de déficit de absorção de vitamina D3 associada a uma dieta desbalanceada em Ca:P a base de leite sem lactose e frutas tenha desencadeado a doença.(AU)

Common opossum population density in an agroforestry system in Bolivia

The common opossum, Didelphis marsupialis thrives near human settlements. Understanding its ecology could help planning management decisions about this species, especially in anthropogenic landscapes. Yet, there are no density estimations for this species throughout its distribution range in Bolivia. We estimated the density of D. marsupialis in a rural agricultural community, where agroforestry plantations and fallows cover most of the land. We counted individuals in line transects and used DISTANCE software to calculate density. We covered a total of 70.21 km in 143 night counts, obtaining 38 records of D. marsupialis. We estimated a density of 0.30 individuals ha-1 (SE = 0.062; range: 0.20 - 0.45 individuals ha-1), with a mean encounter rate of 0.54 individuals km-1. Encounter rate varied between habitats, with mean values of 0.20 in secondary forests and 0.64 in agroforestry plantations. Our density estimate is near the lower range of previously reported values for the common opossum in other countries. We argue that our results may reflect the response to the availability of food resources and predation pressure in agroforestry plantations. (AU)

A case of polymelia associated with syndactyly in Didelphis aurita (Wied-Neuwied, 1826) / Relato de caso de polimelia associada a sindactilia em Didelphis aurita (Wied-Neuwied, 1826)

Abstract In January 2018, a young male of Didelphis aurita (Wied-Neuwied, 1826), the Brazilian common opossum, was admitted for veterinary evaluation at the Recovery Clinic of Wild Animals of Estácio de Sá University, CRAS, in Rio de Janeiro, Brazil, due to the presence of a partially duplicated right hind limb. After x-ray evaluation, polymelia associated with syndactyly was diagnosed. The images revealed the following alterations on the right limb: single femur with increased diameter, two tibiae, two fibulae and absence of hallux. The observed malformations were restricted to the hind right limb, which remains functional. This is the first report of such anomalies in an individual of Didelphis aurita.

Resumo Em janeiro de 2018, um macho jovem de Didelphis aurita (Wied-Neuwied, 1826), o gambá-de-orelha-preta, foi recebido para atendimento veterinário na Clínica de Recuperação de Animais Silvestres (CRAS) da Universidade Estácio de Sá, no Rio de Janeiro, por ser portador de membro posterior direito parcialmente duplicado. Após exame radiográfico, constatou-se a ocorrência de polimelia associada a sindactilia. As imagens radiográficas revelaram as seguintes alterações no membro posterior direito: um fêmur com diâmetro aumentado, duas tíbias, duas fíbulas e ausência de hálux. As malformações observadas restringiram-se apenas ao membro posterior direito, o qual mantém sua funcionalidade. Essas alterações nunca antes foram descritas na espécie Didelphis aurita.

Wildlife rehabilitation: A case study of the neo-tropical, opossum Didelphis marsupialis insularis, Allen 1902 / Reabilitação de vida selvagem: um estudo de caso do gambá neotropical, Didelphis marsupialis insularis, Allen 1902

Abstract Wildlife rehabilitation facilities in the Caribbean region are limited, yet they can provide relevant information on wild populations. Didelphis marsupialis insularis is a popularly hunted, under-studied, neo-tropical marsupial species that is increasingly being admitted for rehabilitation. The aim of this study was 1. To record the experiences of rehabilitating D. marsupialis insularis in the neo-tropical island of Trinidad and Tobago and 2. To extract and highlight information on the biology of this opossum sub-species. Using admission records, obtained over a roughly four year period, two breeding periods (February to March and August to October) were illustrated. Litter sizes averaged five individuals, with a range of 1 to 8 young. This species was found to be common in urban areas of the country, with dog attacks reported as the major cause for admission. Thus the information recorded by this wildlife rehabilitation facility has provided great insight on the sparsely studied opossum, D. marsupialis insularis.

Resumo As instalações de reabilitação e assistência à vida selvagem na região neotropical do Caribe são limitadas, mas informações relevantes sobre populações selvagens podem ser obtidas nesses locais. Didelphis marsupialis insularis é uma espécie de marsupial neotropical, subestimada e popularmente caçada; no entanto, essa espécie está sendo cada vez mais admitida para a reabilitação. Os objetivos deste estudo foram: 1. Registrar as experiências de reabilitação de D. marsupialis insularis na ilha neotropical de Trinidad e Tobago; e 2. Extrair e destacar informações sobre a biologia dessa subespécie de gambá. Utilizando registros de admissão, obtidos ao longo de um período de aproximadamente quatro anos, foram mostrados dois períodos de reprodução, de fevereiro a março e de agosto a outubro. O tamanho da ninhada foi em média de cinco indivíduos, variando de um a oito jovens. Comumente encontrado em áreas urbanas do país, os ataques de cães foram relatados como a principal causa de internação dessa espécie. Assim, a informação registrada por essa instalação de reabilitação de vida selvagem forneceu uma grande visão sobre o gambá D. marsupialis insularis, que tem sido pouco estudado.

Fibroblastic osteosarcoma in a white-eared opossum (Didelphis albiventris) / Osteossarcoma fibroblástico em gambá-de-orelha-branca (Didelphis albiventris)

Osteosarcoma is characterized by the production of osteoid or woven bone, using neoplastic osteoblasts. It is the most common primary bone neoplasm in canines and humans. This neoplasm was previously reported in all vertebrate classes, including a wide variety of mammals. However, there is no case report describing this neoplasm in Didelphis albiventris. Therefore, the objective of this manuscript is to describe the clinical-pathological aspects of fibroblastic osteosarcoma in D. albiventris. A wild adult male white-eared opossum (D. albiventris) arrived at the zoological park of the "Universidade de Caxias do Sul" with a swollen left thoracic limb. After a general clinical examination, the animal was transferred to the Veterinary Clinic of "Universidade de Caxias do Sul" for radiographic examination of the left thoracic limb and thorax. Additionally, some material was collected through fine needle aspiration (FNA) for cytologic evaluation. The radiographic findings and cytologic evaluation indicated osteosarcoma. The animal was euthanized due to severe clinical conditions and guarded prognosis. During necropsy, macroscopic analysis of the viscera was performed, fragments of various organs were collected and fixed in 10% neutral buffered formalin. All fragments were processed following routine histological techniques. The histopathological evaluation confirmed osteosarcoma, which was classified as a fibroblastic subtype. Case reports are crucial for the knowledge of incidence, prevalence, and behavior of the current mentioned disease, as well as other diseases, in species with such limited information. In order to obtain a decisive diagnosis, a few different examination methods were associated. Although the observations presented are based on a single case, this neoplasm had a similar clinical presentation to that described in other species.(AU)

O osteossarcoma é caracterizado pela produção de osteoide ou osso imaturo, por osteoblastos neoplásicos. É a neoplasia óssea primária mais comum em caninos e humanos. Essa neoplasia já foi relatada em todas as classes de vertebrados, incluindo uma grande variedade de mamíferos. Não havendo descrição dessa neoplasia até o momento em Didelphis albiventris. O objetivo deste trabalho é descrever aspectos clínico-patológicos de um caso de osteossarcoma fibroblástico em D. albiventris. Chegou para atendimento no Zoológico da Universidade de Caxias do Sul um gambá-de-orelha-branca (D. albiventris), macho, adulto, de vida livre com aumento de volume no membro torácico esquerdo. Após avaliação clínica geral, o animal foi encaminhado para a Clínica Veterinária da Universidade de Caxias do Sul para realização de radiografia do membro torácico esquerdo e de tórax, sendo também realizada coleta de material por punção aspirativa por agulha fina (PAAF) para avaliação citológica. Os achados radiográficos e da avaliação citológica foram sugestivos de osteossarcoma. Devido ao estado clínico grave e prognóstico reservado optou-se pela eutanásia. Durante a necropsia realizou-se a análise macroscópica das vísceras, foram coletados fragmentos de diversos órgãos, fixados em formalina 10%, processados pelas técnicas histológicas de rotina. Na avaliação histopatológica confirmou-se a suspeita de osteossarcoma sendo classificado no subtipo fibroblástico. A descrição de relatos é fundamental para conhecimento da incidência, prevalência e comportamento desta e de outras doenças em espécies que as informações são limitadas. A associação de diferentes métodos de exames foram necessários para a obtenção de um diagnóstico definitivo. Embora as observações apresentadas se baseiem em um caso único, esta neoplasia possuiu apresentação clínica semelhante a descrita em outras espécies.(AU)

Rickettsial infection in equids, opossums and ticks in the municipality of Monte Mor, state of São Paulo, Brazil / Infecção por Rickettsia spp. em equídeos, gambás e carrapatos do município de Monte Mor, estado de São Paulo, Brasil

Abstract The aim of this study was to investigate rickettsial infection in equids, opossums and ticks in the municipality of Monte Mor, a place where a Brazilian spotted fever case occurred in 2005. In addition, characteristics possibly associated with seropositivity in horses were analyzed. Serum samples from horses, mules and opossums (Didelphis albiventris) were subjected to indirect immunofluorescence assay (IFA) against Rickettsia rickettsii. The ticks collected from the animals were identified and Amblyomma sculptum ticks from the equids were tested using PCR for Rickettsia spp. Anti-R. rickettsii antibodies were detected in 22.6% (14/62) of the horses, none of the mules and 21.7% (5/23) of the opossums. Among the variables analyzed, only age > 12 years showed a statistically significant association with seropositivity among horses. All of the 166 A. sculptum ticks tested using PCR were negative. The results showed that rickettsiae of the spotted fever group was circulating in the municipality of Monte Mor when the samples were collected and indicate a need for surveillance of Brazilian spotted fever in this region.

Resumo Este trabalho objetivou pesquisar a infecção por Rickettsia spp. em equídeos, gambás e carrapatos, do município de Monte Mor, local que teve um caso de febre maculosa brasileira, em 2005. Além disso, características possivelmente associadas com a soropositividade nos equinos foram analisadas. Soros de equinos, muares e gambás Didelphis albiventris foram submetidos à reação de imunofluorescência indireta (RIFI) contra Rickettsia rickettsii. Os carrapatos coletados dos animais foram identificados e os carrapatos Amblyomma sculptum dos equídeos foram testados pela PCR para Rickettsia spp. Anticorpos anti-R. rickettsii foram detectados em 22,6% (14/62) equinos, zero muares e 21,7% (5/23) gambás. Entre as variáveis analisadas, apenas a idade maior que 12 anos mostrou associação estatisticamente significante com a soropositividade em equinos. De 166 carrapatos A. sculptum testados pela PCR, todos foram negativos. Os resultados mostram que riquétsias do grupo da febre maculosa estavam circulando no município de Monte Mor, quando as amostras foram coletadas, e apontam para a necessidade de vigilância para a febre maculosa brasileira nessa região.

Abundancia relativa y patrones de actividad de Didelphis marsupialis en un área periurbana de Medellín, Colombia / Relative abundance and activity patterns of Didelphis marsupialis in a peri-urban area of Medellin, Colombia

RESUMEN Objetivo. Determinar la abundancia relativa y los patrones de actividad de la zarigüeya común (Didelphis marsupialis) en una zona periurbana del municipio de Medellín, departamento de Antioquia. Materiales y métodos. El estudio se desarrolló en la sede de prácticas y clínica veterinaria Remington ubicada en el corregimiento de Santa Elena. Para el registro de datos se empleó la metodología de fototrampeo durante 3 meses (junio-agosto de 2017), invirtiendo un esfuerzo total de 166 días/trampa. Resultados. Se obtuvieron un total de 275 registros independientes de la especie y se estimó una abundancia relativa de 52.88. El patrón de actividad muestra un primer pico de actividad al comienzo de la noche (19:00) y un segundo pico en la madrugada (3:00), con una posterior disminución hacia las horas de la madrugada. Conclusiones. Los resultados muestran una abundancia relativa alta con respecto a otras localidades en Colombia, además de evidenciar una población reproductivamente activa. Al mismo tiempo se convierten en una herramienta para el fortalecimiento de estrategias de conservación y sensibilización a los pobladores locales sobre la fauna de la región.

ABSTRACT Objective. The relative abundance and activity patterns of the common opossum Didelphis marsupialis were determined in a peri-urban area of Medellín municipality, Antioquia department. Materials and methods. The study was developed in the Remington Veterinary practice at Santa Elena Corregimiento. The data recording was carried out through camera trapping methodology for three months (June-August 2017) with a total effort of 166 days-camera. Results. With a total of 275 independent records, we calculate the relative abundance index (52.88 UNITS). The activity patterns show a first activity peak beginning the night (19:00) and a second one after midnight (3:00), reducing the activity in the sunrise hours. Conclusions. These results present a high relative abundance in comparison to another Colombian localities, besides a population active reproductively. At the same time, they become a tool to support conservation strategies and sensitizing local people about the wildlife of this region.

Genetic variability of populations of the white-eared opossum, Didelphis albiventris Lund 1840 (Didelphimorphia; Didelphidae) in Brazil / Variabilidade genética de populações de gambá de orelha branca, Didelphis albiventris Lund 1840 (Didelphimorphia; Didelphidae) no Brasil

Abstract Didelphis albiventris are found throughout Northeast and Central Brazil to central-southern Uruguay and it was subject of few studies in a population level. Given this, the present study investigated the genetic variability of the species using the mitochondrial molecular marker cytochrome oxidase c subunit I. We analyzed samples from the different biomes within three Brazilian regions: Northeast (Caatinga , Cerrado, and Atlantic Forest), Southeast (Cerrado , Atlantic Forest, Cerrado/Atlantic Forest, and Cerrado/Caatinga ecotones) and South (Pampa and Atlantic Forest). Software BAPs retrieved five distinct demes: dm 1, dm 2, and dm 5 that occurs in South, Northeast and Southeast regions respectively and the dm 3 and dm 4 are wide distributed in Northeast and Southeast. Population analysis performed with AMOVA, haplotype network and Mantel test estimated the veracity of the demes. The FST shows structuring for the five demes, with dm 1 (South region) isolated from the others, however the other analysis showed the Northeast/Southeast demes (dm 2-5) united, diagnosing gene flow between them, mainly at the transitional zones, in areas as far away as areas with similar latitude interval (Southeast vs South) that was not detected gene flow. In the haplotype network, the mutational steps was conclusive in split dm1 from dm 2-5 with 15 mutational steps and the Mantel test was moderated, which is explained by genetic similarity despite the great geographic distances (Northeast/Southeast). Thus, our analysis recognized two different lineages (South and Northeast/Southeast) and indicate that the biomes were not decisive in their isolation. The sharing of demes at the transitional zones and in areas with high latitudinal intervals reflects a recent ancestral polymorphism for D. albiventris. The plasticity in the occupation of the space by this species contributes in its wide dispersion capability, that is, geographical distribution. Our results revealed important implications for the management of D. albiventris in these transitional zones areas where demes were shared.

Resumo Didelphis albiventris é encontrada em todo o Nordeste e região central do Brasil até o centro-sul do Uruguai e foi alvo de poucos estudos em nível populacional. Dessa forma, o presente estudo, investiga a variabilidade genética da espécie usando o marcador molecular citocromo c oxidase subunidade I. Analisou-se amostras de diferentes biomas de três regiões brasileiras: Nordeste (Caatinga, Cerrado e Floresta Atlântica), Sudeste (Cerrado, Floresta Atlântica, ecótonos Cerrado/Floresta Atlântica e Cerrado/Caatinga) e Sul (Pampa e Floresta Atlântica). O software BAPs recuperou cinco demes distintos: dm 1, dm 2 e dm 5, que ocorrem nas regiões Sul, Nordeste e Sudeste, respectivamente, e os dm 3 e dm 4, que são amplamente distribuído no Nordeste e Sudeste. Análises populacionais realizadas com AMOVA, rede de haplótipo e teste de Mantel estimaram a veracidade das demes. O FST mostrou estruturação para as cinco demes, com dm 1 (região Sul) isolada das demais, entretanto as outras análises mostraram as demes Nordeste/Sudeste (dm 2-5) unidos, diagnosticando fluxo gênico entre elas, principalmente em zonas de transição, em áreas tão distante quanto áreas com similar intervalo de latitude (Sudeste e Sul), onde não foram detectado fluxo gênico. Na rede de haplótipo, os passos mutacionais foram conclusivos em separar dm 1 do dm 2-5 com 15 passos mutacionais, e o teste de Mantel foi moderado, o que é explicado pela similaridade genética apesar da grande distância geográfica (Nordeste/Sudeste). Assim, duas linhagens diferentes (Sul e Sudeste/Nordeste) foram encontradas, indicando que os biomas não foram decisivos em seus isolamentos. Os compartilhamentos das demes, em zonas de transição e em áreas com elevados intervalos de latitude, refletem um polimorfismo ancestral recente para D. albiventris. A plasticidade na ocupação do espaço por esta espécie contribui em sua ampla capacidade de dispersão, ou seja, distribuição geográfica. Nossos resultados revelam importantes implicações para o manejo de D. albiventris nessas áreas de zonas de transição, onde as demes são compartilhadas.

Volumetric computed tomography reconstruction, rapid prototyping and 3D printing of opossum head ( Didelphis albiventris ) / Reconstrucción volumétrica por tomografia computarizada, prototipado rápido e impresión 3D de cabeza de zarigüeya ( Didelphis albiventris )

Natural anatomical pieces of wild animals are rare and teachers seek alternatives in satisfactory quantity and quality to inform their students. This article aims to describe the use of multiplanar reconstructions and 3D volume rendering computed tomography (CT) images, rapid prototyping and 3D printing of opossum head to create a biomodel to veterinary education in descriptive anatomy of wild animals. A six-step method study was conducted to construct the biomodel: (1) selection of opossum head from museum; (2) CT scanning of bones structures in veterinary hospital; (3) DICOM visualization medical images in multiplanar reconstructions and 3D volume rendering; (4) .dicom file conversion to .stl; (5) 3D printing of opossum head by rapid prototyping; (6) comparison of 3D model printed with the original anatomical piece. The use of CT images with their different forms of reconstruction can provide a more comprehensive 3D view of opossum craniofacial region and allow a better understanding of head anatomy of this species. The 3D printed biomodel can be a viable alternative to original bone specimens when used in anatomy education. However, further studies must be continued to validate the method in Veterinary Medicine courses.

Las piezas anatómicas naturales de animales salvajes son raras y los profesores buscan alternativas satisfactorias, en cantidad y calidad, para enseñar a sus alumnos. Este artículo tuvo como objetivo describir el uso de la reconstrucción volumétrica por tomografía computarizada, la creación rápida de prototipos y la impresión 3D de la cabeza de zarigüeya para obtener un biomodelo en anatomía descriptiva de animales salvajes para educación veterinaria. Se realizó un estudio en seis pasos para construir el biomodelo: (1) selección de cabeza de zarigüeya del museo; (2) tomografía computarizada de estructuras óseas en hospital veterinario; (3) visualización de las imágenes médicas en DICOM por reconstrucciones multiplanares y renderización de volumen 3D; (4) conversión de archivos .dicom a .stl; (5) impresión 3D de cabeza de zarigüeya mediante prototipado rápido; (6) comparación del modelo 3D impreso con la pieza anatómica original. El uso de imágenes de tomografía computarizada, con sus diferentes formas de reconstrucción, puede proporcionar una vista 3D más completa de la región craneofacial de zarigüeya y permitir una mejor comprensión de la anatomía de la cabeza de esta especie. El biomodelo 3D impreso puede ser una alternativa viable a las muestras óseas originales cuando se utiliza en la educación de la anatomía. Sin embargo, se deben continuar los estudios para validar el método en los cursos de Medicina Veterinaria.

Surveillance of phlebotomine fauna and Didelphis marsupialis (Didelphimorphia: Didelphidae) infection in an area highly endemic for visceral leishmaniasis in Colombia / Vigilancia de la fauna flebotomínea e infección de Didelphis marsupialis (Didelphimorphia: Didelphidae) en un área de alta endemia de leishmaniasis visceral en Colombia

Abstract Introduction: The study of the interaction between the parasite, the vector and the mammalian hosts, including man, allows to understand the behavior of the leishmaniases. Objective: To determine the presence of Lutzomyia species and to detect the Leishmania infection in Didelphis marsupialis in an endemic area for visceral leishmaniasis. Materials and methods: Phlebotomine fauna and individuals of D. marsupialis were collected with CDC and Tomahawk™ traps, respectively. The species of Lutzomyia were identified using the Young and Duncan key (1994). Ear and tail biopsies and blood samples from D. marsupialis were taken to identify the Leishmania species by amplifying a fragment of the gene associated with the 70 kD heat shock protein. Results: Seven Lutzomyia species were identified: Lu. evansi, Lu. gomezi, Lu. panamensis, Lu. dubitans, Lu. cayennensis cayennensis, Lu. rangeliana and Lu. trinidadensis. The first three species have epidemiological importance in Colombia because of their implications in the transmission of the Leishmania parasite. Sixty-five tissue samples from 19 D. marsupialis individuals were negative for Leishmania spp. Conclusions: The presence of the Lutzomyia species that have been identified as vectors for Leishmania inside and around houses in the village of El Bledo, in El Carmen de Bolívar represents a risk of infection. Furthermore, the presence of Lu. panamensis is reported for first time in El Carmen de Bolívar in Colombia. Although the lack of detection of Leishmania spp. in D. marsupialis samples may suggest that D. marsupialis does not play an important role in the transmission cycle of Leishmania in this region, it is necessary to carry out further longitudinal studies to confirm this hypothesis.

Resumen Introducción. El estudio de la interacción entre el parásito, el vector y los huéspedes mamíferos, incluido el hombre, permite entender el comportamiento de la leishmaniasis. Objetivo. Determinar la presencia de especies del género Lutzomyia y detectar la infección por Leishmania spp. en Didelphis marsupialis en un área endémica de leishmaniasis visceral. Materiales y métodos. Se recolectaron flebotomíneos y D. marsupialis con trampas CDC y Tomahawk™, respectivamente. Las especies de Lutzomyia se identificaron usando la clave de Young y Duncan, 1994. Se tomaron biopsias de oreja, cola y muestras de sangre de D. marsupialis para diagnosticar Leishmania spp. mediante la amplificación de un fragmento del gen de la proteína de choque térmico de 70 kD. Resultados. Se identificaron siete especies de Lutzomyia: Lu. evansi, Lu. gomezi, Lu. panamensis, Lu. dubitans, Lu. cayennensis cayennensis, Lu. rangeliana y Lu. trinidadensis. Las tres primeras especies son reconocidas como vectores en el país por estar implicadas en la transmisión de Leishmania spp. En total, 65 muestras de tejidos de oreja, cola y de sangre provenientes de 19 D. marsupialis fueron negativas para Leishmania spp. en la PCR-HSP70. Conclusiones. La presencia de flebotomíneos con importancia epidemiológica en la zona evaluada representa un riesgo de transmisión. Asimismo, Lu. panamensis es reportada por primera vez en El Bledo (Carmen de Bolívar). La ausencia de Leishmania spp. en D. marsupialis podría sugerir que esta especie no tiene un papel importante en el ciclo de transmisión de Leishmania en la vereda El Bledo, por lo que es necesario profundizar en estudios longitudinales para corroborar esta hipótesis.

Detection of a putative novel genotype of Ehrlichia sp. from opossums (Didelphis aurita) from Brazil / Detecção de um suposto novo genótipo de Ehrlichia sp. em gambás (Didelphis aurita) do Brasil

Abstract Erlichiosis affects humans and animals worldwide. Its distribution and prevalence depends on the presence of tick vectors and hosts in one geographic area. The aim of the present study was to investigate the occurrence of Ehrlichia spp. and Anaplasma spp. in opossums (Didelphis sp.) from the State of Rio de Janeiro, southeast Brazil. Blood samples from 37 animals were tested for these two pathogens using molecular methods. One animal (2.7%) was positive for Ehrlichia sp. by 16S rRNA-based nested PCR. In a phylogenetic analysis based on the 16S rRNA gene using the maximum likelihood method and the GTRGAMMA+I evolutionary model, we detected a novel Ehrlichia sp. genotype closely related to genotypes of E. canis previously reported in dogs from Brazil. To the authors' knowledge, this is the first molecular detection of Ehrlichia sp. in opossums from this State in the southeastern region of the country.

Resumo A erliquiose afeta seres humanos e animais em todo o mundo. Sua distribuição e prevalência dependem da presença de vetores de carrapatos e hospedeiros em uma área geográfica. O objetivo do presente estudo foi investigar a ocorrência de Ehrlichia sp. e Anaplasma sp. em gambás (Didelphis sp.) do Estado do Rio de Janeiro, sudeste do Brasil. Amostras de sangue de 37 animais foram testadas para estes dois patógenos usando métodos moleculares. Um animal (2,7%) foi positivo para Ehrlichia sp. baseado em 16S rRNA-nested PCR. Em uma análise filogenética baseada no gene 16S rRNA usando o método de máxima verossimilhança e o modelo evolutivo GTRGAMMA + I, detectamos um novo genótipo de Ehrlichia sp. intimamente relacionado a genótipos de E. canis previamente relatados em cães do Brasil. Para o conhecimento dos autores, esta é a primeira detecção molecular de Ehrlichia sp. em gambás deste estado na região sudeste do país.

Duplicidad de la vena renal derecha en Didelphis aurita (Didelphimorphia: Didelphidae): reporte de un caso / Double right renal vein in Didelphis aurita (Didelphimorphia: Didelphidae): case report

El Didelphis aurita, conocido como comadreja de orejas negras, es un marsupial con amplia distribución en la América del Sur, frecuente tanto en los ambientes silvestres como antrópicos debido a su gran plasticidad ecológica. Animales de esta especie son comúnmente atendidos en la medicina de animales silvestres y vienen siendo empleados como modelos experimentales alternativos a especies tradicionales. El objetivo de ese trabajo fue relatar la ocurrencia de un caso de vena renal doble en un espécimen adulto, macho, de D. aurita. Para eso, se ha disecado un cadáver fijado y conservado en solución de formaldehído 10%, previamente inyectado con látex de color azul por la porción torácica de la arteria aorta para facilitar la disección. El espécimen poseía dos venas renales derechas, una vena craneal (11,3 mm) y otra caudal (10,0 mm) que drenaban distintamente para una vena cava caudal. La vena renal izquierda y las arterias renales eran únicas. Aunque la duplicidad de la vena renal es reportada en otras especies como perros, gatos y felideos silvestres, este es el primer relato en el género Didelphis. El conocimiento de las variaciones anatómicas vasculares es relevante para la correcta ejecución de procedimientos veterinarios y en la interpretación de hallazgos experimentales en relación con el sistema urogenital.

Didelphis aurita, known as black eared oposum, is a marsupial widely distributed in South America, frequently seen in both wild and anthropogenic environments due to its great ecological plasticity. This species is commonly treated in wildlife veterinary services and has been used as alternative experimental models instead of conventional species. The aim of this report was to describe a case of double renal vein in a male, adult, specimen of D. aurita. In order to make the dissection easier, the cadaver was fixed and preserved in 10 % formaldehyde solution, and previously injected with latex in blue color by the thoracic aorta to facilitate dissection. The specimen had two right renal veins, one cranial (11.3 mm) and other caudal (10.0 mm) that drained distinctly for caudal vena cava. The left renal vein and the renal arteries were single. Although double renal vein has been reported in other species, such as dogs, cats and wild felids, this is the first mention in the genus Didelphis. The knowledge of the vascular anatomical variations is relevant for the correct execution of veterinary procedures and the interpretation of experimental findings in urogenital system research.

Trypanosoma janseni n. sp. (Trypanosomatida: Trypanosomatidae) isolated from Didelphis aurita (Mammalia: Didelphidae) in the Atlantic Rainforest of Rio de Janeiro, Brazil: integrative taxonomy and phylogeography within the Trypanosoma cruzi clade

BACKGROUND Didelphis spp. are a South American marsupial species that are among the most ancient hosts for the Trypanosoma spp. OBJECTIVES We characterise a new species (Trypanosoma janseni n. sp.) isolated from the spleen and liver tissues of Didelphis aurita in the Atlantic Rainforest of Rio de Janeiro, Brazil. METHODS The parasites were isolated and a growth curve was performed in NNN and Schneider's media containing 10% foetal bovine serum. Parasite morphology was evaluated via light microscopy on Giemsa-stained culture smears, as well as scanning and transmission electron microscopy. Molecular taxonomy was based on a partial region (737-bp) of the small subunit (18S) ribosomal RNA gene and 708 bp of the nuclear marker, glycosomal glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (gGAPDH) genes. Maximum likelihood and Bayesian inference methods were used to perform a species coalescent analysis and to generate individual and concatenated gene trees. Divergence times among species that belong to the T. cruzi clade were also inferred. FINDINGS In vitro growth curves demonstrated a very short log phase, achieving a maximum growth rate at day 3 followed by a sharp decline. Only epimastigote forms were observed under light and scanning microscopy. Transmission electron microscopy analysis showed structures typical to Trypanosoma spp., except one structure that presented as single-membraned, usually grouped in stacks of three or four. Phylogeography analyses confirmed the distinct species status of T. janseni n. sp. within the T. cruzi clade. Trypanosoma janseni n. sp. clusters with T. wauwau in a well-supported clade, which is exclusive and monophyletic. The separation of the South American T. wauwau + T. janseni coincides with the separation of the Southern Super Continent. CONCLUSIONS This clade is a sister group of the trypanosomes found in Australian marsupials and its discovery sheds light on the initial diversification process based on what we currently know about the T. cruzi clade.